产品货号:
YS0002
中文名称:
过氧化氢酶检测试剂盒(荧光法)
英文名称:
Fluorimetric Catalase Assay Kit
产品规格:
200T
发货周期:
1~3天
产品价格:
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本产品是用于检测过氧化氢酶的试剂盒,为过氧化氢酶活性的测量提供了一种快速而灵敏的方法,可以方便的96孔或384孔微量滴定板形式进行,并且无需分离步骤即可轻松适应自动化。
AmpFluo Red可与H2O2反应生成红色荧光产物。因此,荧光强度的降低与过氧化氢酶活性成比例。荧光信号可以通过Ex/Em = 540/590nm的荧光酶标仪或~576nm的吸光度酶标仪容易地读取。使用AmpFluo荧光过氧化氢酶分析试剂盒,我们在100μL反应体积中检测到低至30 mU/mL的过氧化氢酶。
组分 | 规格 |
组分A:AmpFluo Red | 1支 |
组分B:3% H2O2 | 200μL |
组分C:Assay Buffer | 50mL |
组分D:HRP | 20U |
组分E:过氧化物酶标准品(1000U/mL) | 50μL |
组分F:DMSO | 200μL |
保存:-20℃,避光。其中Assay Buffer收到后置于2~8℃保存。
- 实验开始前将所有试剂置于室温解冻。
- 组分A在硫醇如DTT和β-巯基乙醇存在下不稳定。硫醇的最终浓度高于10μM将显著降低测定动态范围。
- NADH和GSH也可能干扰检测。
以下贮备液制备完成后应分装冻存,避免反复冻融。
- 200×AmpFluo Red底物贮备液:
取65μL DMSO (组分F)加入到AmpFluo Red(组分A)管中,制成200×AmpFluo Red底物贮备液,配置完成后尽早用完。 - 100U/mL HRP贮备液:
取200μL Assay Buffer(组分C)加入到HRP(组分D)管中,配制成100U/mL HRP贮备液。 - 10mM H2O2贮备液:
取10μL的3%H2O2(组分B,0.88M)加入到870μL的Assay Buffer(组分C)中,即配制成10mM H2O2贮备液。
注:稀释后的H2O2贮备液不太稳定,未用完的部分丢弃勿用。 - 1×H2O2 assay buffer:
取5μL的10mM H2O2贮备液加入到5mL Assay Buffer(组分C)中,配制成1×H2O2 assay buffer。 - 2U/mL过氧化物酶标准溶液:
取2μL 1000U/mL过氧化物酶标准品(组分E)加入到1mL Assay Buffer(组分C)中,配制成过氧化物酶标准溶液(2U/mL)。 - 过氧化物酶梯度标准液:
取2U/mL过氧化物酶标准溶液(CS7),用Assay Buffer(组分C)按2倍稀释成梯度浓度,即CS6→CS1分别是1U/L、0.5U/L、0.25U/L、0.125U/L、0.062U/L、0.031U/L。 - AmpFluo Red工作液:
取25μL AmpFluo Red底物贮备液(200×)和15ulHRP贮备液(100U/mL),加入到5mL Assay Buffer(组分C)中,混匀即是AmpFluo Red工作液,注意避光。
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